Методи спектрофотометрії та екстракції за точкою хмарності для кількісного визначення кверцетину дигідрату у добавках та зразках сечі

Анотація

Точне виявлення та кількісне визначення кверцетину дигідрату (QRC) є важливими для контролю якості, фармакокінетичних досліджень та оцінки біодоступності в фармацевтичних та біологічних зразках. Метою цього дослідження було розробити та валідувати метод екстракції за точкою хмарності (CPE) у поєднанні зі спектрофотометрією для чутливого та екологічно безпечного виявлення та кількісного визначення QRC у фармацевтичних формулах та зразках сечі.

Методи. Метод CPE використовував Тритон X-114 як неіонний поверхнево-активний агент для екстракції QRC із зразків. Процес екстракції був оптимізований шляхом оцінки ключових параметрів, таких як концентрація поверхнево-активної речовини, температура інкубації, час екстракції та швидкість центрифугування. Спектрофотометричний аналіз проводився до та після екстракції для оцінки чутливості та лінійності методу. Метод було валідовано з використанням зразків сечі з додаванням фармацевтичних формул QRC, із оцінкою відновлення, меж виявлення (LOD) та лінійності для забезпечення чутливості та точності.

Результати. Оптимізовані умови CPE включали температуру інкубації 65°C, час екстракції 5 хвилин та центрифугування на 3500 об/хв. Метод CPE значно покращив чутливість виявлення QRC, зменшивши LOD з 0,0351 мкг/мл (без CPE) до 0,0234 мкг/мл (з CPE). Метод показав відмінну лінійність (r² > 0,998) в широкому діапазоні концентрацій (1–12 мкг/мл). Високі коефіцієнти відновлення (98,88% до 101,6%) і низькі відносні стандартні відхилення (RSD < 2%) були отримані в фармацевтичних формулах та зразках сечі, що свідчить про точність та прецизійність методу. Фактор збагачення становив 1,75, а фактор передконцентрації — 4,6.

Висновки. Запропонований метод CPE у поєднанні зі спектрофотометрією є простим, чутливим та екологічно безпечним підходом для аналізу QRC у добавках та зразках сечі. Він має значні переваги порівняно з традиційними методами, зокрема зменшену кількість використаних органічних розчинників та зменшення утворення відходів, що робить його придатним для рутинного аналізу в контролі якості фармацевтичних засобів та в фармакокінетичних дослідженнях. Запропонований метод можна адаптувати для складних матриць, таких як сеча, а також для більш широкого застосування, включаючи аналіз інших поліфенольних сполук.